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    Pannarase耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型

    鹽耐受全能核酸酶(Salt Active Nuclease, SAN)是一種重組非特異性核酸內切酶,與全能核酸酶相比,具有較高鹽濃度耐受,廣泛應用于生產工藝流程中高鹽環境下核酸(包括雙鏈和單鏈DNA和RNA)污染去除。

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    應用文獻
    產品特點:
    更高鹽耐受度:在150-900 mM鹽濃度范圍內有效,600-700 mM時產品活性最佳
    高效核酸降解:有效去除核酸污染

    應用場景:

    病毒純化、疫苗生產、蛋白和多糖類制藥工業等核酸污染的去除


    檢測數據:

    1.耐鹽曲線

    當鹽離子濃度在600~700mM時,Chaselection初代全能核酸酶幾近失活,而SAN仍能保持較高活性。


    2.酶切效果
    同對照組相比,添加SAN后能夠有效去除核酸殘留。



    主要用途:

    1.疫苗和病毒樣品制備中高鹽環境下DNA污染的去除

    2.與細胞或細菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸,降低溶液粘性,提高蛋白質產量
    3.減少存放的外周血單細胞(PBMC)的結塊現象
    4.降解核酸,利于不可溶性蛋白復性前高質量包涵體制備

    5.有效去除帶負電荷的核酸對雙向SDS-PAGE蛋白樣品的影響,改善蛋白質分離效果,增強2-DE分辨率


    訂購信息:

    產品貨號

    產品名稱

    級別

    產品規格

    CY070F0010

    耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型

    科研級

    100 kU

    CY070F0050

    耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型

    科研級

    500 kU

    CYG070F0010

    耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型

    GMP級

    100 kU

    CYG070F0050

    耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型

    GMP級

    500 kU

    CYG070F0500

    耐高鹽全能核酸酶(SAN),更高鹽耐受型

    GMP級

    5000 kU


    Q:使用后如何滅活或去除耐高鹽全能核酸酶?
    A:由于SAN的等電點很高(9.6),可以很容易地用離子交換色譜法去除酶。熱滅活不是很有效。在70°C時,SAN的半衰期約為2小時,但SAN易受還原劑的影響,這些還原劑如DTT或TCEP可以增強酶的熱失活。加入螯合劑也會抑制SAN活性。

    Q:耐高鹽全能核酸酶是否可以用于病毒載體的純化,例如基于AAV的載體?
    A:是的,這種內切酶適合用于病毒載體的純化。病毒載體的純度在細胞或動物的體內轉導之前至關重要。鹽通常是通過最小化聚集和增加目標產量來實現高度純化載體的重要組成部分。SAN高質量與使用高鹽條件高度兼容。

    Q:與非鹽活性核酸酶相比,耐高鹽活性SAN的優點和缺點是什么?
    A:許多蛋白質緩沖液含有高濃度的鹽,以便從蛋白質中釋放DNA。與其他核酸酶相比,SAN在高鹽濃度下具有最佳活性。因為最優活動依賴于鹽,所以在待檢測樣品中鹽含量非常少的情況下,SAN的活性可能不高。

    Q:SAN 在含有0.1% Triton® X-100的溶液中具有活性嗎?
    A:是的。不過活性會降低至正?;钚缘?0%。在0.5% Triton® 中,將幾乎沒有活性。

    Q: SAN在含有10%甘油的緩沖液中有活性嗎?
    A:有活性,但是活性降低了,約為與不含甘油樣品的80%活性。在50%的甘油溶液中,幾乎沒有活性。

    Q:可以用SAN替代Benzonase的所有應用場景嗎?
    A:在需要在高鹽緩沖液中作用的非特異性核酸酶的應用中,SAN可以代替Benzonase。

    Q:如何較為直觀的判斷SAN是否發揮作用?
    A:隨著SAN降解DNA和RNA,細胞裂解液在視覺上變得不那么粘稠。任何核酸檢測方法都可以用于檢測核酸的消化效果。

    Q:SAN 的最低反應溫度是多少?
    A:最佳反應溫度為37℃。SAN在低溫下也很活躍,但反應會慢一些。4℃時的活性約為37℃時活性的5-10%。這可以通過增加反應時間或在反應中使用的酶的量來補償。
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