<rp id="f8k7t"></rp>
  • <th id="f8k7t"></th>
    <th id="f8k7t"><track id="f8k7t"><sup id="f8k7t"></sup></track></th>
    簡體中文
    簡體中文
    English
    產品中心
    定制服務
    語言

    CHASELECTION Activin A

    激活素 A 是 TGF-β 家族成員,是人類妊娠期間胎盤產生的一種多功能細胞因子,在多種組織和細胞
    中廣泛表達,在傷口修復、細胞分化、細胞凋亡、胚胎發生和炎癥等方面發揮著調節作用。人類結直腸癌和絕經后婦女中激活素 A 水平升高分別與結直腸癌和乳腺癌有關。激活素 A 的生物活性可被抑制素和可擴散的 TGF-β 拮抗劑卵泡抑素中和。激活素 A 結合兩種形式的激活素受體 I 型(Act RI-A 和 Act RI-B)和兩種形式的激活素受體 II型(Actⅲ-A 和 Actⅲ- b)。激活素是不同 β 亞基的同二聚體或異二聚體。它們是作為前體蛋白產生的,其氨基端前肽被裂解以釋放 c 端生物活性配體。14kDa 的成熟人 β A 鏈與牛、貓、小鼠、豬和大鼠 βA 具有 100%的氨基酸序列一致性。重組人激活素 A 是一個 26.0 kDa 的二硫鏈同源二聚體,由兩條 βA 鏈組成,每條鏈含有 116 個氨基酸殘基。

    產品信息
    文件下載
    Q&A
    應用文獻
    別名(Synonym):Inhibin beta-1, FRP, FSH(Follicle-Stimulating Hormone)-releasing protein,

    Erythroid Differentiation Factor (EDF)

    來源(Source):HEK293

    蛋白結構(Structure):該蛋白不含標簽
    編號:P08476 基因 ID:3624
    氨基酸序列:GLECDGKVNI CCKKQFFVSF KDIGWNDWIIAPSGYHANYC EGECPSHIAG TSGSSLSFHS

    TVINHYRMRG HSPFANLKSC CVPTKLRPMSMLYYDDGQNI IKKDIQNMIV EECGCS

    分子量(MW.): 25.95 kDa

    純度(Purity):≥95% (SDS-PAGE & HPLC)

    SDS PAGE:

    還原和非還原條件 SDS-PAGE 電泳圖


    內毒素含量(Endotoxin):< 0.5EU/ μ g
    制劑(Formulation):

    100mM HAc, PH3.0


    訂購信息:

    產品貨號

    產品名稱

    級別

    產品規格

    CY046F0010

    Activin A

    科研級

    10 μg

    CY046F0020

    Activin A

    科研級

    20 μg

    CY046F0050

    Activin A

    科研級

    50 μg


    Q: 細胞因子是什么

    A: 細胞因子(cytokine,CK)是由多種組織細胞(主要為免疫細胞)所合成和分泌的小分子多肽或糖蛋白。細胞因子能介導細胞間的相互作用,具有多種生物學功能,如調節細胞生長、分化成熟、功能維持、調節免疫應答、參與炎癥反應、創傷愈合和腫瘤消長等。


    Q: 常見細胞因子及其功能

    A: (1) 白細胞介素(interleukin, IL):由淋巴細胞、單核細胞或其它非單個核細胞產生的細胞因子,在細胞間相互作用、免疫調節、造血以及炎癥過程中起重要調節作用。

    (2) 集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF):根據不同細胞因子刺激造血干細胞或分化不同階段的造血細胞在半固體培養基中形成不同的細胞集落,不同CSF不僅可刺激不同發育階段的造血干細胞和祖細胞增殖的分化,還可促進成熟細胞的功能。

    (3) 干擾素(interferon, IFN)各種不同的IFN生物學活性基本相同,具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調節等作用。

    (4) 腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor, TNF):兩類TNF基本的生物學活性相似,除具有殺傷腫瘤細胞外,還有免疫調節、參與發熱和炎癥的發生。大劑量TNF-α可引起惡液質,因而TNF-α又稱惡液質素(cachectin)。


    Q: 細胞因子凍干產品使用注意事項

    A: 凍干粉產品在運輸過程中會有粉末黏在管壁或蓋上,使用前請勿開蓋并離心處理 20-30 秒(高速離心機,約13000 rpm),使附于管蓋或管壁的蛋白收集于管底。亦可使用最高轉速為4000-4500rpm的離心機離心5分鐘(3000-3500rpm),也能達到類似的效果。雖然有時管中蛋白粉末不可見或者可視數量很少,我們的質控體系保證每管中所含的蛋白量是準確且足量的。


    Q: 細胞因子凍干產品的溶解

    A: (1) 使用前準備:使用前先離心(見上文),使附于管蓋或管壁的蛋白沉于管底;

    (2) 溶解液

    ① 要求用無菌去離子水溶解的產品,務必不可用鹽溶液,避免過高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出;不可用PBS或培養液(1640或DMEM等)直接溶解,否則蛋白可能無法完全溶解,從而導致蛋白活性不足或失活;

    ② 要求用鹽溶液溶解的產品,請依照說明書上的濃度,同樣也是為了避免過高的鹽濃度;

    ③ 亦可聯系我們的技術支持獲得關于單獨產品的溶解液的選擇。

    (3) 溶解到指定的濃度:

    ① 我們建議最佳濃度一般不低于100 μg/mL,如10μg的凍干粉,則加入10 μL-100μL的溶解液;

    ② 高于或低于最佳濃度,細胞因子可能會不穩定,或者聚集,導致部分蛋白沉淀,影響其活性。高于這個濃度范圍,可能會超過該蛋白的最大溶解濃度,即蛋白無法完全溶解;

    ③ 用移液槍輕吹混勻,或將管蓋蓋好后輕柔顛倒數次進行混勻,低速離心數秒;溶解時不可振蕩,避免因化學鍵的斷裂造成蛋白失活;

    ④ 將溶解后的蛋白在室溫放置數分鐘,以保證蛋白能夠充分溶解。建議將不易溶解的蛋白用低速搖床促進其溶解。

    (4) 溶解后的保存:

    不建議用推薦的溶解液做進一步稀釋。溶液中的蛋白很容易黏附在凍存管壁,且很難與管壁分離。使用含有載體蛋白的溶液(該溶液通常是指pH近中性,有一定緩沖能力的緩沖液,如PBS,培養液等)預先封閉塑料管壁上的蛋白結合位點,使細胞因子或重組蛋白不會黏于管壁,方可更好地保存蛋白溶液;

    ① 短期保存:在一般情況下,上文中建議的濃度是較高的。我們建議將該溶液用含載體蛋白(如0.1% BSA、10% FBS、5% HSA)的溶液進行稀釋,分裝存于4℃并于一周內用完,分裝體積不要小于20μL。否則稀釋后的細胞因子或重組蛋白很容易會粘附在管壁或瓶壁上,使得溶液中的細胞因子或重組蛋白的濃度下降,從而影響其生物活性;

    ② 長期保存:若配置的溶液無法一次用盡,我們建議用含載體蛋白(如0.1% BSA、10% FBS、5% HSA)的溶液進一步稀釋,分裝凍存于-20℃至-80℃,分裝體積不要小于20 μL;

    ① 在做無血清培養或動物的體內實驗時,細胞因子中不能含有BSA,FBS或HSA等動物或人的成分,可用含5%海藻糖(Trehalose)的溶液來稀釋已溶解的細胞因子或重組蛋白,然后分裝凍存,分裝體積不要小于20μL。


    Q: 重組蛋白的檢測都有哪些?

    A: 基因序列:經N端序列分析。必要時,使用SDS-PAGE,HPLC和質譜分析等方法與標準品進行比對;

    蛋白純度:

    (1) 經SDS-PAGE

    (2) HPLC分析

    生物活性:經相關的體外或體內生物活性檢測,詳見下文;

    蛋白含量:

    (1) 紫外分光光度

    (2) BCA蛋白定量測定

    (3) SDS-PAGE分析

    (4) HPLC法與標準品比對

    內毒素含量:經動態LAL(西方鱟試劑)法或TAL(東方鱟試劑)法測定;

    無菌:所有蛋白溶液在分裝凍干前經0.22μm濾膜過濾除菌,在B+A級環境分裝、凍干及封蓋;

    分子量:SDS-PAGE分析;

    宿主蛋白殘留:熒光染色;

    宿主DNA殘留:ELISA試劑盒;

    支原體檢測:支原體試劑盒。


    Q: 重組蛋白的生物活性是什么?

    A: 蛋白質的生物活性是各種蛋白質功能的體現?;蛘吣梢岳斫庵挥械鞍踪|有活性的概念,它才能執行它的功能。具有生物活性的蛋白質稱為活性蛋白質,即具有生物活性的活性蛋白質。從理論上講,天然蛋白都是活性蛋白,而重組蛋白并不總是活性蛋白,因為重組蛋白的產生是一個復雜的過程,其中許多因素對其生物活性至關重要,例如理想的表達系統、合適的表達載體、純化等。

    1. ED50的計算:

    逐典的蛋白產品ED50(即半數有效濃度,其定義是對特定細胞引起 50% 最大反應的蛋白濃度,單位為ng/mL)可在蛋白產品COA中獲取,這種活性表示法僅適用于劑量反應曲線呈 S 形的細胞因子。將1 ng/mL ED50 定義為 1 unit,則產品生物學活性 Specific Activity 的換算公式如下:

    Specific Activity(units/mg)= 1 × 10 6 ÷ ED50(ng/mL)

    以上計算公式并不適用于International Units(IU)和ED50的換算關系,我們建議采用國際標準品對比相同實驗獲得該蛋白的IU值。

    2. 影響ED50的因素:

    產品說明書中的實驗方案只是確認該產品的ED50,如果客戶的實驗類型與我們相同,則可以按照產品標定的生物活性進行實驗;若實驗采用了不同的細胞種類或方法,我們建議客戶按照梯度濃度通過實驗獲得最佳ED50值,并依據此數值制定相應的實驗方案以及產品的添加量。如對生物活性或實驗方法有疑問,可聯系我們的技術支持(技術支持郵箱support@chaselection.com)。

    欧洲一卡2卡三卡4卡无卡免费|中国黄色片XXXXHD20l20|亚洲A∨国产AV综合AV下载|无码专区国产精品日韩精品一区二区三区