Pannarase是一種來自于粘質沙雷氏菌（Serratia marcescens），經基因工程改造的核酸內切酶，能夠將各種類型的DNA和RNA降解成3~5個堿基長度的5’-單磷酸寡核苷酸，又被稱為“全能核酸酶”。廣泛用于疫苗、細胞與基因治療等領域的病毒純化工藝。
產品性質：
項目 | 描述 |
規格 | 10萬/50萬/500萬 U/管 |
分子量 | 27kDa |
純度 | ≥99% (SEC-HPLC) |
比活性 | ≥2x106 U/mg |
最適pH | 8.0 |
最適溫度 | 37°C |
輔助因子 | 1-10 mM Mg2+ |
緩沖液 | 20 mM Tris-HCl pH 8.0, 2 mM NaCl, 2 mM MgCl2, 50% (v/v) 甘油 |
儲存溫度 | -20°C，避免反復凍融 （由于甘油的存在，-20°C條件下不會凍?。?/span> |
活力單位：通過測定其裂解鯡魚精DNA底物的能力（herring Sperm DNA， Sigma，目錄號D7290）一個單位Pannarase全能核酸酶活力定義為在37°C pH8.0反應條件下30分鐘內導致A260nm值降低1.0（相當于完全消化37ug DNA）。
產品特點：
SEC-HPLC：（純度99.72%）
尺寸排阻色譜顯示高純度，無聚集體產生
LC-MS檢測：
液質聯用分析蛋白分子與理論值一致，無雜質峰，結構均一
應用案例：
對質粒DNA的酶切活性
對比不同品牌核酸酶的酶切效果圖
（反應條件：20uL反應體系其中質粒DNA濃度為1mg/ml）
運輸和保存方法：干冰運輸。-15℃ ~ -25℃保存，有效期2年。
推薦使用條件：
反應條件 | 最適條件* | 有效條件** |
Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8.0-9.2 | 6.0-10.0 |
Na+/K+濃度 | 0-20 mM | 0-150 mM |
溫度 | 37℃ | 4-42℃ |
(Dithiothreitol)DTT | 0-100 mM | 0-300 mM |
2-mercaptoethanol | 0-100 mM | 0-300 mM |
PO43- | 0-10 mM | 0-100 mM |
* “最適條件” 指的是在此條件下Pannarase 核酸酶可保持>90%的活性
** “有效條件” 指的是在此條件下Pannarase 核酸酶可保持>15%的活性
使用方法：
1.對于大腸桿菌破碎液
為了達到降低粘度的目的，加入核酸酶的用量須根據破碎液的菌體濃度來決定，如果菌體濃度在50%，建議加入的核酸酶的量為1：1000-5：1000，即50萬-250萬U/L。如果菌體濃度在5%，則可以按照1：10000-5：10000的比例加入。
2.對于細胞裂解液
可以按照106-107個細胞加入500單位核酸酶。
3.對于純化后的腺病毒或者病毒疫苗
由于DNA含量相對較少，可以按照萬分之一到萬分之五也就是每毫升5個單位的最終濃度加入。
注意事項：
1.酶的最佳作用條件為pH 8.0–11.0，37°C，30min。
2.鎂離子對酶活是必要的，推薦使用濃度為2mM，如樣品中有DETA等金屬螯合劑，需去除或加入過量鎂離子。
3.酶活性比較穩定，室溫放置短期內不會有太大影響，長時間保存需放置在-20°C冰箱內。酶用不含甘油緩沖液稀釋后盡快使用，不推薦凍存后再使用。
4.對于僅為降低粘度為目的，可以直接加入核酸酶，室溫緩慢攪拌30min。
訂購信息：
產品貨號 產品名稱 級別 產品規格 CY002F0010 Pannarase全能核酸酶 科研級 100 kU CY002F0050 Pannarase全能核酸酶 科研級 500 kU CYG002F0010 Pannarase全能核酸酶 GMP級 100 kU CYG002F0050 Pannarase全能核酸酶 GMP級 500 kU CYG002F0500 Pannarase全能核酸酶 GMP級 5000 kU
Q: 什么是Pannarase全能核酸酶
A: Pannarase是一種來源于 Serratia marcescens 的非特異性核酸內切酶，該酶可以將任何形式的 DNA 和 RNA ?(線性、環形、超螺旋)降解成3-5bp 的寡核苷酸，并可在一系列寬泛的操作條件下保持高效性
Q: 哪些因素會影響Pannarase全能核酸酶的消化效果？
A: 酶的添加量，反應條件（例如：時間、溫度、pH值），緩沖環境（例如：是否存在酶的抑制劑）等。不同樣本的最佳使用量，需要經過實驗摸索。
Q: 哪些條件會抑制Pannarase全能核酸酶的活性？
A: Pannarase全能核酸酶可在較寬條件下保持活性，二價陽離子（Mg2+）對其活性至關重要。當在含有以下物質的體系中，其活性會受到抑制：> 300 mM一價陽離子，> 100 mM磷酸鹽，> 100 mM鹽酸胍，> 100 mM硫酸銨等。
當體系中含有較高濃度一價陽離子時，推薦選擇逐典耐高鹽全能核酸酶
Q: 如何去除Pannarase全能核酸酶？
A: 使用常規色譜法，如親和色譜法和離子交換色譜法，可以很容易地去除Pannarase全能核酸酶。其他方便的純化方法，如切向流過濾（TFF）也適用于從生物制品中去除Pannarase全能核酸酶。
